dNTP用途
高質量的脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 對 PCR 、 RT-PCR 、測序和標記等反應的成功都非常重要； PCR反應中 dUTP 替代 dTTP ，導致產物中含有尿嘧啶，這種摻入適用於很多應用，將尿嘧啶－ N －糖基化酶 UNG酶(有時稱為UDG) 加入到 PCR 反應中，可切割任何污染PCR產物中的尿嘧啶，從而避免錯誤的形成，這在臨床 PCR 診斷試劑中應用非常廣氾。如果四種脫氧核糖核苷酸的濃度不一致，將大大增加聚合酶的錯配機率；如果純度不高，或者混有甲基化的脫氧核糖核苷酸將造成產物的甲基化；或者含有脫氧核糖核苷一磷酸、脫氧核糖核苷二磷酸也會降低聚合酶的聚合能力。
dNTP特征
• 特異性吸光值：
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Nucleotide
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250/260
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280/260
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dATP
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0.80 ± 0.03
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0.15 ± 0.03
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dCTP
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0.80 ± 0.03
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0.96 ± 0.03
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dGTP
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1.15 ± 0.03
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0.67 ± 0.03
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dTTP
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0.60 ± 0.03
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0.70 ± 0.03
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dUTP
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0.73 ± 0.03
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0.38 ± 0.03
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• 吸收波長
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l max.
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dATP
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256nm
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dCTP
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252nm
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dGTP
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271nm
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dTTP
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267nm
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dUTP
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262nm
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• HPLC 分析， 脫氧核糖核苷三磷酸的純度＞ 98% 。
• dNTP 熱穩定實驗比較
